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药敏试验测量药物敏感性,便于准确合理地使用药物进行治疗。目前临床医学微生物实验室开展药敏试验的主要方式有试纸条扩散法、稀释法(包括琼脂和骨汤稀释法)、抗生素浓度梯度法(E-test法)、自动化技术仪器设备等。
介绍
体外抗菌药敏试验,俗称药敏试验(AST),是指测量药物在体外抗菌或杀菌能力的实验。
根据美国临床医学实验室标准化协会(NCCLS)最近强烈推荐的标准,选择非苛化菌(肠杆菌科、铜绿假单胞菌和其他非肠杆菌科、葡萄球菌和肠球菌)和苛化菌(嗜血杆菌、淋球菌、肺炎球菌和其他链球菌感染)作为基本药物敏感性试验的首选药物(A组抗生素)或临床医学应用的关键抗生素。
抗生素在控制细菌感染性疾病中起着关键作用。而很多高致病性细菌在整个饲养过程中由于不理性、盲目跟风而对抗生素产生耐药性,使得抗菌药物对细菌性疾病的实际防治效果越来越差,不仅导致药物消耗,还会延误病情,给养殖场造成很大的财产损失。
随着新致病菌的不断出现,抗菌药物的预防效果越来越差。而且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同,同一病原体的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也不同。一直以来,各种致病菌的耐药性导致各种常用抗菌药物失效,无法掌握药物对致病菌的敏感性。因此,一个合适的结果可以作为临床医生使用抗菌药物和提高疗效的参考。财政部动物检疫所青岛亿邦生物科技有限公司小动物疾病诊疗管理中心总结了几个适宜的农村基层单位开展药敏试验的操作步骤,现简要详细介绍如下。
归类
纸条外扩散法
该方法是将定量分析抗菌药物的滤纸粘贴在已接种检测菌的琼脂表面,纸中的药物在琼脂中扩散。随着扩散距离的增加,抗菌药物的浓度大多降低,然后在纸张周围产生浓度梯度。另外,纸条周围抗菌浓度范围内的细菌不能生长发育,抗菌范围外的细菌可以生长发育,然后纸条周围就会产生一个完全透明的抑菌圈。由于药物在琼脂中的外扩散速率的影响,不同抗菌药物的抑菌圈直径可能不同。抑菌圈的大小可以反映被测细菌对药物的敏感程度,与药物对被测细菌的MIC成反比。
稀释液法
稀释药敏试验可用于定量分析和检测抗菌药物对某种病原体的体外特异性,分为琼脂稀释法和骨汤稀释法。在试验过程中,抗菌药物的浓度值一般要经过lg2的稀释,从最低药物浓度值到最低抗菌浓度值(MIC)能抑制待测菌的生长发育。特殊抗菌药物的检测浓度范围应包括能检验该菌的解释折点(敏感性、中介公司、耐药性)的浓度值,还应包括质控用参考菌的MIC。
2.1琼脂稀释法最早用含抗菌药物的琼脂稀释法制备平板电脑。接种测试菌株,然后判断结果。
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